·会阴整形与研究·

    基金项目:卫生部临床重点项目资助(项目编号:20010409)

    作者单位: 100041 北京,中国医学科学院整形外科医院尿道下

    裂中心(李强、李森恺、徐家杰) ;中国医学科学院基础医学研究所生

    物化学国家重点实验室(王艳平、沈岩)

    尿道下裂患者雄激素受体基因突变的研究

    李强 李森恺 徐家杰 王艳平 沈岩

    【摘要】 目的 研究国人尿道下裂患者雄激素受体基因突变情况。方法 采集92例各型尿道

    下裂患者外周抗凝血 ,使用酚P 氯仿变性法提取基因组DNA ,通过 PCR扩增DNA测序的方法 ,检测了

    雄激素受体2～7外显子全部序列。结果 4例患者外周血提取的基因组DNA中具有雄激素受体基

    因外显子突变 ,第4外显子1例(664 ATT→ ACT) ;第7外显子 3 例(840 CGT→CAT 、 855 CGC→CAC 、859 CTC→CTA) 。结论 雄激素受体基因点突变可能是尿道下裂的发病原因之一 ,但是所占比例仅

    为413 %。

    【关键词】 尿道下裂 雄激素受体 基因突变

    Study of genic mutations of androgen receptor in hypospadias LI Qiang

    3

    ,LI Sen2kai , XU Jia2jie ,WANG

    Yan2ping , SHEN Yan.

    3

    Treatment center of hypospadias in Plastic Surgery Hospital of Chinses Academy of Medical

    Sciences. Beijing 100041 ,China

    【Abstract】 Objective To study genic mutation of androgen receptor in hypospadias in Chinese. Meth2

    ods Ninety 2two patients with hypospadias were selected for the AR gene study (penile 33 ,scrotal 49 ,perineal

    10 ;cryptorchidism 15 ,micropenis 34 ,indirect hernia 3 ,augmentation of breast 2 ,other deformities 8 ;posses family

    history 23)while 93 health men as the control . The DNA was collected from 5 ml venous blood by using the meth 2

    od of phenolP chloroforml ,and quantified with the agarose gel electrophoresis. The 2 28 exons of AR genes were di2

    rectly sequenced with a PCR technique. The locus of mutation ,the change of amino acid caused by genic mutation

    and the functional influence of target organ were also analyzed. Results There were 4 mutations found from the

    ligand binding domain of AR:exon 4[ 1 locus :664(ATT→ACT] and exon 7 [ 3 locuses :840 (CGT→CAT) ,855

    (CGC→CAC) ,859(CTC→CTA) ] in experimental group. The amino acid change of Iso664Thr may be the first

    findings in the world. The mutation of 859(CTC→CTA) didn’ t cause the change of the code amino acid. The main

    clinical symptoms of exon 4[664 (ATT→ ACT) ]were micropeins ,slight hypospadias and augmentation of breasts.

    The exon 7[840(CGT→CAT) ,855(CGC→CAC) ]was showing micropenis and severe hypospadias. The last mu 2

    tation [859(CTC→CTA) ]of exon 7 showed mild hypospadias. Conclusions The rate of exon 2 27 mutations of

    the androgen receptor was 413 %. The mutations were concentrated on ligand binding domain(exon 427) ,and the

    main phenotypes were hypospadias accompanying with micropenis found in our experimental group.

    【Key words】 Hypospadias ; Androgen receptor ; Genic mutation

    尿道下裂是一种常见的男性泌尿生殖系统的先

    天性畸形 ,是 20 余种性分化不良疾病的表现之

    一[1 ]。大多数尿道下裂患者病因仍不清楚 ,仅 1P 4

    患者可以发现确定的病因[2 ]。目前的研究表明雄激

    素受体(AR)突变可能是尿道下裂病因之一 ,但仅占

    患者的1 %左右[1 ,3 ]。2000 年 7 月以来我们对 92 例

    尿道下裂患者的 AR 基因进行了测序检测 ,结果表

    明国人尿道下裂患者中AR突变较国外的报道为高

    (413 %) ,应予重视。

    1 材料与方法

    111 样本采集

    11111 实验组 将 2000 年 7 月～2001 年 8 月在我

    院就诊的全部尿道下裂患者中 ,同意进行 AR 基因

    检测研究者 92 人列为实验组。其中阴茎型 33 例

    (3518 %) 、阴茎 - 阴囊型和阴囊型 49 例(5312 %) 、会阴型 10 例 ( 1110 %) ;其合并症有:隐睾 15 例

    (1613 %) 、小阴茎34 例(3619 %) 、斜疝3例(312 %) 、乳房发育2例(211 %) 、其它畸形 8 例(817 %) ;具有

    · 224 · 中华整形外科杂志2004年11月第20卷第6期 Chin J Plast Surg , Nov. 2004 Vol . 20 No. 6

    ? 1995-2006 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.家族史的 23 例(25 %) ;平均年龄 11 岁。使用 ACD

    抗凝剂 ,抽取抗凝外周静脉血 4～5 ml ,按住院时间

    先后编号。

    11112 对照组 随机抽取 2001 年 9～11 月间在协

    和医院中心血站健康男性献血员93人为对照组 ,平

    均年龄27岁 ,收集抗凝检验用血2～3 ml。

    112 基因组DNA的提取、定量

    采用酚P 氯仿法提取外周血白细胞中的DNA ,乙醇

    沉淀法收集DNA ,琼脂糖凝胶电泳法进行DNA定量 ......